是否有時候,你也對微電極拉制儀耗材的選用拿不準:
不同實驗,玻璃管選厚壁還是薄壁?
如何判斷何時更換加熱片?
到了什麼程度要更換幹燥劑?……
耗材沒選對,往往直接影響實驗結果!别急,本期幹貨從玻璃管、加熱片、幹燥劑三大部分,帶你輕松get微電極拉制儀耗材選用!
PART.01 玻璃管篇
1、玻璃管材質類型有哪些,如何選擇?
主要有3類,硼矽酸鹽玻璃(Borosilicate, B)、鋁矽酸鹽玻璃(Aluminosilicate, A)和石英(Quartz, Q),均屬于硬質玻璃。普遍使用的是硼矽酸鹽玻璃,熔點最低(約800℃),應用廣泛,包括膜片鉗電極、細胞注射電極等等;石英熔點最高(約1700℃),電極尖端最硬,比較昂貴,較少使用。
2、玻璃管包裝信息代表什麼含義?
以瑞沃德的毛細玻璃管為例,型号B-15086-10F,B代表硼矽酸鹽玻璃材質,150代表外徑(outer diameter, OD)為1.5mm,86代表内徑(inner diameter, ID)為0.86mm,10代表玻璃管長度為10cm,F代表帶芯玻璃管(Filament)。重點關注内外徑參數,其對電極尖端大小影響不同。
3、玻璃管的薄壁和厚壁如何區分,不同實驗場景如何選擇呢?
一般是将内徑/外徑的比例<0.6稱為厚壁玻璃管,≥0.7稱為薄壁玻璃管,通常内外徑之比在0.5-0.75,但其實兩者無嚴格界限。厚壁拉制出的電極頸部較長,尖端較小,電容噪聲較低,适合作為膜片鉗記錄電極等;薄壁拉制出的電極尖端較大,電阻較低,适合各種注射電極。
4、玻璃管帶芯的作用是什麼?
帶芯的目的是為了便于灌注電極内液,盡快排出電極内的氣泡。這個“芯”指的是玻璃管内部側壁上與玻璃管煅燒在一起的玻璃細管,在灌注電極内液時可以引導液體迅速到達尖端。如細胞内記錄電極,尖端直徑小于1μm時,灌注内液變得很困難,需要使用帶芯的電極。
PART.02 加熱片篇
1、加熱片的類型有哪些,如何選擇?
主要包括槽形加熱片與盒形加熱片,後者使用更為普遍。盒形加熱玻璃管比較均勻,無中軸偏離情況,拉制時間較短,特别适合拉制膜片鉗電極、顯微注射電極等。
2、加熱片的不同長度和寬度對拉制效果有什麼影響?
加熱片越寬,拉制出的電極頸部越長;加熱片越窄,電極的頸部越短,尖端較小。
3、如何判斷何時更換加熱片?
加熱片對于拉制電極的穩定性至關重要,當有以下情況時需進行加熱片的更換:
a. 加熱片表面坑坑窪窪,顔色灰暗,類似很舊的鋁箔;
b. 加熱片形狀扭曲,凹陷明顯,被玻璃管觸碰過(如下圖左圖);
c. 加熱片的使用時間過長,或使用非常頻繁,呈現變薄的狀态。
4、加熱片被燒壞的原因可能有哪些?
可能原因有:
a. 初次使用/更換玻璃管/更換加熱片後,沒有進行軟化點測試直接調用程序拉制電極,此時的熱量可能遠大于軟化點,從而導緻燒壞加熱片;
b. 熱量值過大。在調試過程中,通過不斷增加熱量以獲得高電阻或小口徑的電極,當熱量增加到一定程度時,會燒毀加熱片。
因此,初次使用/更換玻璃管/更換加熱片後首先要進行軟化點測試,增加熱量時一般不超過軟化點的15%。
PART.03 幹燥劑篇
1、幹燥劑的組成及作用方式是什麼?
幹燥劑主要由無水硫酸鈣組成,用于吸收空氣冷卻系統中的水蒸氣。幹燥劑對于拉制電極穩定性較為重要,當空氣冷卻系統濕度增大時,拉制出的電極尖端口徑大小波動較大。因此需要多加注意幹燥劑的顔色變化。
2、如何判斷何時更換幹燥劑?
幹燥劑幹燥狀态下為藍色或者藍紫色,吸潮後變成粉紅色。當幹燥劑大部分為粉紅色時(一般2/3時),需要更換幹燥劑,保證拉制效果穩定。
通過閱讀以上内容,相信很多小夥伴都有種豁然開朗的感覺~更加了解拉制儀配套耗材的選擇及使用,可以大大提升我們的實驗效率。
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