引物合成的具體實驗步驟:
1、脫掉附加在CPG擔體上的第一個堿基5羟基基團上的保護基,準備附加下一個新的堿基;
2、活化新的堿基單體,準備與第一個堿基進行反應;
3、第二個堿基與第一個堿基發生偶聯反應;
4、将沒有反應的第一個堿基的5羟基加帽封死,使其不再進一步參與反應;
5、将核苷亞磷酸酯氧化成更穩定的核苷磷酸酯。
6、重複進行第一步到第五步的循環,直至合成完所需的Oligo DNA序列。
7、合成結束後,将Oligo DNA分子從CPG上切下,再進行進一步的純化。
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