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求問引物合成的具體實驗步驟

知識 更新时间:2025-02-24 13:08:17

  引物合成的具體實驗步驟:

  1、脫掉附加在CPG擔體上的第一個堿基5羟基基團上的保護基,準備附加下一個新的堿基;

  2、活化新的堿基單體,準備與第一個堿基進行反應;

  3、第二個堿基與第一個堿基發生偶聯反應;

  4、将沒有反應的第一個堿基的5羟基加帽封死,使其不再進一步參與反應;

  5、将核苷亞磷酸酯氧化成更穩定的核苷磷酸酯。

  6、重複進行第一步到第五步的循環,直至合成完所需的Oligo DNA序列。

  7、合成結束後,将Oligo DNA分子從CPG上切下,再進行進一步的純化。

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