此培養基含有伊紅和美藍兩種染料作為指示劑。蛋白胨提供細菌生長發育所需的氮源、維生素和氨基酸,乳糖提供發酵所需的碳源,磷酸氫二鉀維持緩沖體系,伊紅和美藍抑制絕大部分革蘭氏陽性菌的生長。瓊脂是凝固劑。大腸杆菌可發酵乳糖産酸造成酸性環境時,這兩種染料結合形成複合物,使大腸杆菌菌落帶金屬光澤的深綠色,而與其他不能發酵乳糖産酸的微生物區分開。沙門氏菌形成無色菌落。金黃色葡萄球菌基本上不生長。
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