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體外轉錄的步驟有哪些

知識 更新时间:2024-10-02 01:23:51

  轉錄通常發生在生物體内,如果我們将含有RNA轉錄酶、NTP等條件,在體外無細胞系統中,用DNA作為模闆,模仿體内轉錄過程生成RNA,這樣的技術則能夠控制轉錄的基因、轉錄的過程和轉錄後RNA的用途,該技術被稱為體外轉錄。

  體外轉錄的步驟如下:

  1、 提取cDNA質粒;

  2、 線性化質粒;

  3、 純化質粒: 加等體積的Tris苯酚氯仿到100微米限制内切酶消化體系,渦旋振蕩20秒, 13000克離心5分鐘。上清轉移,加入2倍體積無水乙醇和1比10體積的的

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