昆蟲百科知識?昆蟲細胞表達系統是四大表達系統（昆蟲細胞、細菌、酵母、哺乳動物細胞表達系統）之一昆蟲細胞表達系統原理是通過轉座作用将轉移載體中的表達組件定點轉座到能在大腸杆菌中增殖的杆狀病毒穿梭載體（Bacmid）上，通過抗性和藍白斑篩選到重組穿梭質粒，提取穿梭質粒DNA轉染昆蟲細胞後，得到的子代病毒即為重組病毒将病毒上清浸染昆蟲細胞，獲得表達的重組蛋白，我來為大家科普一下關于昆蟲百科知識?下面希望有你要的答案，我們一起來看看吧!

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昆蟲細胞表達系統是四大表達系統（昆蟲細胞、細菌、酵母、哺乳動物細胞表達系統）之一。昆蟲細胞表達系統原理是通過轉座作用将轉移載體中的表達組件定點轉座到能在大腸杆菌中增殖的杆狀病毒穿梭載體（Bacmid）上，通過抗性和藍白斑篩選到重組穿梭質粒，提取穿梭質粒DNA轉染昆蟲細胞後，得到的子代病毒即為重組病毒。将病毒上清浸染昆蟲細胞，獲得表達的重組蛋白。

杆狀病毒是一類閉合環狀雙鍊病毒，病毒粒子呈杆狀，以昆蟲為主要宿主。杆狀病毒還是一種出芽型分泌性病毒粒子，在感染細胞後能迅速在培養細胞中水平傳播而保持細胞在相當長的時間内不裂解，從而最大限度地保持了外源蛋白的穩定，昆蟲細胞表達系統又被稱為昆蟲杆狀病毒系統。昆蟲細胞表達系統本身是一個蛋白裂解性系統，在杆狀病毒感染昆蟲細胞的過程中，杆狀病毒可以編碼一些蛋白酶如木瓜蛋白酶等導緻蛋白的降解。因此，收集細胞後，在裂解細胞之前要加入蛋白酶抑制劑防止蛋白的降解。

昆蟲細胞表達系統屬于真核細胞表達系統，但又不同于酵母及哺乳動物細胞表達系統，酵母表達的蛋白易純化但也易降解，而哺乳動物細胞表達系統表達的蛋白具有生物活性但成本高。細菌表達系統屬于原核表達系統，操作簡單、周期短收益大、表達産物穩定，但是表達基因的相對分子量有限，且不能對表達産物進行翻譯後加工修飾。而昆蟲細胞表達系統具有很多優點：

(1)具有糖基化作用、乙酰化作用、磷酸化作用等一系列蛋白質翻譯加工修飾系統；

(2)正确的蛋白折疊、二硫鍵形成，使重組蛋白在結構和功能上更接近天然蛋白，有利于表達産物形成天然的高級結構；

(3)具有對重組蛋白進行定位的功能，如将核蛋白轉送到細胞核上，膜蛋白則定位在膜上，分泌蛋白則可分泌到細胞外等；

(4)昆蟲細胞懸浮生長，容易放大培養，有利于大規模表達重組蛋白。高表達量，最高表達量可達昆蟲細胞蛋白總量的50%；

(5)可表達非常大的外源性基因（~200kD）而不至于影響本身的增殖；

(6)具有在同一個感染昆蟲細胞内同時表達多個基因的能力；

(7)通用性廣，能用于表達來自病毒、細菌、真菌、植物和動物幾乎所有的蛋白，并且能表達帶有内含子的外源基因；

(8)對脊椎動物是安全的，杆狀病毒屬于昆蟲病毒，有高度特異的宿主範圍，對脊椎動物和植物均無緻病性，而且經重組後的病毒因失去多角體保護而使其在自然界的生存能力很弱，被認為是安全的載體。

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