斐林試劑、班氏試劑和雙縮脲試劑比較

1、斐林試劑和班氏試劑

（1）成分不同：班氏試劑的配置方法：400mL水中加85g檸檬鈉和50g無水碳酸鈉；50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。制成CuSO4溶液；把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液-Na2CO3溶液中，邊加邊攪，如産生沉澱可濾去。斐林試劑的配置為：斐林試劑甲液為0.1 g/mLNaOH的溶液。乙液為0.05 g/mL CuSO4的溶液。使用時，将4～5滴乙液滴入2 mL甲液中，混合後立即使用

（2）原理不同：檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強堿弱酸鹽，在水中它們均可水解産生OH-，與檸檬酸鈉-Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合時，Cu2 和OH-結合，生成Cu(OH)2與葡萄糖中的醛基（-CHO）反應生成磚紅色沉澱。而斐林試劑則是CuSO4于NaOH發生反應生成Cu(OH)2。當然，無論用班氏試劑還是斐林試劑，歸根結底都是Cu(OH)2與醛基（-CHO）在沸水浴加熱條件下反應而生成磚紅色的Cu2O沉澱，兩者反應現象一樣，這就是二者的相同之處。

（3）保存方式不同：斐林試劑甲和斐林試劑乙可産生較多地Cu(OH)2，很容易沉澱析出，因此斐林試劑一般為現用現配；而班氏試劑的配方中，檸檬酸鈉為-Na2CO3一對緩沖物質，産生的OH-數量有限，與溶液混合後産生的Cu(OH)2濃度相對較低，不易析出，因此該試劑可長期保存。

2、斐林試劑和雙縮脲試劑

（1）濃度不同：斐林試劑甲為0.1 g/mL NaOH溶液，斐林試劑乙液為濃度為0.05 g/mL的CuSO4；雙縮脲試劑A為0.1 g/mL NaOH溶液（與斐林試劑甲完全相同），雙縮脲試劑B為0.01 g/mL的CuSO4溶液（與斐林試劑乙液濃度不同）

（2）使用原理不同：斐林試劑是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加熱條件下與醛基反應，被還原成磚紅色的Cu2 O沉澱，可用于鑒定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時，溶液的顔色變化過程為：淺藍色→棕色→磚紅色（沉澱）。

鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，使用的是雙縮脲試劑，發生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在堿性環境下Cu2 的與雙縮脲試劑發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲(H2NOC-NH-CONHH2)結構相似的肽鍵，所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生紫色反應，可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質的存在。

（3）使用方法不同：斐林試劑使用時，先将NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合，而後立即使用；雙縮脲試劑使用時，先加入NaOH溶液（2mL），振蕩搖勻，造成堿性的反應環境，然後再加入3~4滴CuSO4溶液，振蕩搖勻後觀察現象。如果混合後使用或者次序颠倒，則過多的Cu2 （藍色）使溶液生成的紫色被掩蓋，實驗效果不容易觀察。

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